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在畜牧業(yè)生產(chǎn)中,為減少豬病的發(fā)生和流行,除加強(qiáng)豬場(chǎng)的隔離消毒,減少環(huán)境中的病毒,還必須合理的免疫程序,使得豬體內(nèi)長(zhǎng)期保持抵抗豬病強(qiáng)毒攻擊的有效抗體,而要了解豬體內(nèi)的有效抗體水平,就必須開(kāi)展豬病免疫抗體水平監(jiān)測(cè)。
目前國(guó)內(nèi)對(duì)豬病抗體水平檢測(cè)方法很多,如ELISA檢測(cè)法、DOT-ELISA檢測(cè)法和間接血凝法等,這些檢測(cè)方法雖然具有微量、特異的優(yōu)點(diǎn),但需要條件較好、設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)室,對(duì)操作人員要求專(zhuān)業(yè)性高,而且檢測(cè)程序繁瑣,一次檢測(cè)至少需要6個(gè)小時(shí)。不適合于缺少儀器設(shè)備和專(zhuān)門(mén)技術(shù)人員的基層獸醫(yī)站、養(yǎng)豬場(chǎng)的使用。
近年來(lái),隨著膠體金免疫層析技術(shù)及生化制備技術(shù)的發(fā)展,在人醫(yī)上用膠體金免疫層析法檢測(cè)血清中各種抗體已成為現(xiàn)實(shí)。
目前,“豬病(豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、豬偽狂犬病毒、豬口蹄疫病毒、圓環(huán)病毒)抗體快速檢測(cè)卡"就可以在很短的時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出豬只接種豬?。ㄈ缲i瘟)疫苗后,豬體是否產(chǎn)生有效抗體、為當(dāng)前*檢測(cè)手段。
且該方法操作簡(jiǎn)便,不需要任何儀器設(shè)備及復(fù)雜的樣品處理,檢測(cè)一個(gè)樣品只需10-15min,結(jié)果顯示直觀(guān),重復(fù)性好,容易判定,非常適應(yīng)基層獸醫(yī)站、獸醫(yī)門(mén)診和各養(yǎng)豬場(chǎng)開(kāi)展疫病的監(jiān)測(cè)及區(qū)域性疫病普查。
原理:本試劑采用膠體金免疫層析試驗(yàn)(GICA)原理制成,樣本加入到加樣孔后與膠體金標(biāo)記物一起沿層析膜移動(dòng),若樣本中存在豬瘟病毒抗體則與膠體金標(biāo)記物及檢測(cè)線(xiàn)上的抗原結(jié)合而顯示紫紅色,若樣本中不存在豬瘟病毒抗體則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
檢測(cè)方法:撕開(kāi)檢測(cè)卡鋁箔包裝袋,取出檢測(cè)卡,放于平整、潔凈的臺(tái)面上,使用袋內(nèi)吸管取1滴血清或2滴全血緩慢滴加到加樣孔內(nèi),再滴加2滴稀釋液到加樣孔。室溫下放置,10-15 分鐘判斷結(jié)果,15 分鐘后的顯色結(jié)果無(wú)效。
結(jié)果判斷:
1、陰性:在觀(guān)察孔內(nèi),只有對(duì)照線(xiàn)區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線(xiàn)。
2、陽(yáng)性:在觀(guān)察孔內(nèi),檢測(cè)線(xiàn)區(qū)(T)及對(duì)照線(xiàn)區(qū)(C)同時(shí)出現(xiàn)紫紅色線(xiàn)。抗體滴度越高,檢測(cè)線(xiàn)(T)顏色越深。
3、無(wú)效:在觀(guān)察孔內(nèi),對(duì)照線(xiàn)區(qū)(C)不出現(xiàn)紫紅色線(xiàn)。
診斷參考
1、 如果該豬未接種過(guò)豬瘟病毒疫苗:
A. 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(xiàn) T 處無(wú)明顯色帶出現(xiàn),該樣本中不含有豬瘟病毒抗體,如果種群健康,則表示沒(méi)有豬瘟病毒感染,應(yīng)當(dāng)及時(shí)進(jìn)行豬瘟病毒疫苗接種。如果出現(xiàn)相應(yīng)的急性癥狀,則不能排除有豬瘟病毒感染。
B. 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(xiàn) T 處有明顯色帶出現(xiàn),則該動(dòng)物存在豬瘟病毒感染,或既往感染,應(yīng)進(jìn)一步驗(yàn)證。
2、 如果該豬已接種過(guò)豬瘟病毒疫苗:
A. 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(xiàn) T 條帶的色澤≥對(duì)照卡中 1:32 效價(jià)時(shí),說(shuō)明豬瘟病毒抗體的滴度較高,已達(dá)到抵御野毒攻擊的保護(hù)水平,同時(shí)說(shuō)明感染野毒的可能性較小。
B. 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(xiàn)T 條帶的色澤<對(duì)照卡中 1:32 效價(jià)時(shí),說(shuō)明豬瘟病毒抗體效價(jià)未達(dá)到抵御豬瘟病毒野毒攻擊的*保護(hù)滴度,存在感染野毒的風(fēng)險(xiǎn),建議進(jìn)行疫苗補(bǔ)種。
鑒于豬?。ㄈ缲i瘟)抗體快速檢測(cè)卡具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速和容易判定的特點(diǎn),就能為一些基層獸醫(yī)站和養(yǎng)豬場(chǎng)檢測(cè)豬?。ㄈ缲i瘟)抗體提供非常好的條件。
根據(jù)我們的實(shí)際經(jīng)驗(yàn),我們以豬瘟抗體快速檢測(cè)卡為例說(shuō)明,在以下幾種情況下使用豬?。ㄈ缲i瘟)抗體快速檢測(cè)卡,對(duì)指導(dǎo)豬病(如豬瘟)免疫和建立適宜的免疫程序,可以收到很好的效果。
一、可用于檢驗(yàn)豬瘟疫苗的質(zhì)量和確定免疫的最適劑量
如養(yǎng)豬專(zhuān)業(yè)戶(hù)或大型養(yǎng)豬場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)大批量的豬瘟疫苗放在自己場(chǎng)里的冰箱凍結(jié)層內(nèi),每次*購(gòu)買(mǎi)同一批號(hào)(一般以生產(chǎn)日期定批號(hào))的豬瘟疫苗。可以從中取出一瓶疫苗,選擇不同日齡的乳豬,小豬,種豬若干頭,分別應(yīng)用2頭份,3頭份,4頭份,5頭份豬瘟疫苗進(jìn)行免疫接種,免疫15天后采血,用抗體快速檢測(cè)卡測(cè)定抗體滴度,如果各組都能產(chǎn)生抵制豬病強(qiáng)毒攻擊的免疫抗體時(shí),則可以從中選擇免疫頭份少,抗體滴度高作為本批號(hào)疫苗*免疫劑量。如果檢測(cè)的豬瘟抗體達(dá)不到強(qiáng)毒攻擊的*保護(hù)抗體時(shí),則應(yīng)當(dāng)檢查是否是疫苗本身問(wèn)題,還是豬群存在有免疫抑制病毒(如圓環(huán)病毒)等的干擾。
這時(shí)可以采取更換該廠(chǎng)家不同批號(hào)的豬瘟疫苗或另選廠(chǎng)家的豬瘟疫苗,再按上述方法進(jìn)行不同劑量免疫,來(lái)確定是否是該批疫苗失效或是免疫抑制病毒的干擾,判定適宜的免疫劑量。
二、在母豬分娩時(shí)使用
當(dāng)母豬分娩時(shí),用豬瘟抗體快速檢測(cè)卡檢測(cè)母豬的抗體水平。
檢測(cè)結(jié)果:如果在試紙條上只出現(xiàn)一條色線(xiàn)(C質(zhì)控線(xiàn)),說(shuō)明母豬體內(nèi)的豬瘟抗體滴度已低于抵抗豬瘟強(qiáng)毒攻擊的*保護(hù)抗體,母豬應(yīng)當(dāng)及時(shí)進(jìn)行豬瘟疫苗接種,同時(shí)乳豬應(yīng)當(dāng)及時(shí)采用超前免疫,以免發(fā)生豬瘟病。如果母豬檢測(cè)出現(xiàn)二條色線(xiàn),說(shuō)明體內(nèi)的豬瘟抗體滴度較高,可以抵抗豬瘟強(qiáng)毒的攻擊,就不需要進(jìn)行超前免疫,因?yàn)槟肛i可以通過(guò)初乳把豬瘟抗體垂直帶給仔豬。這時(shí)仔豬可以按照正常的免疫程序進(jìn)行預(yù)防注射。
三、當(dāng)無(wú)法判斷有無(wú)豬瘟?xí)r使用
當(dāng)從外地,尤其是從外地區(qū)或外省購(gòu)進(jìn)大批量的小豬種或種豬時(shí),飼養(yǎng)主自己無(wú)法了解購(gòu)買(mǎi)的小豬是否進(jìn)行過(guò)豬瘟疫苗免疫或者免疫是否有效。為了防止豬瘟病發(fā)生,選擇什么時(shí)間再進(jìn)行豬瘟免疫最適宜時(shí),則可以根據(jù)不同地區(qū),不同日齡的豬只,選擇有代表性的豬只采血,應(yīng)用豬瘟抗體快速檢測(cè)卡進(jìn)行快速檢測(cè),通過(guò)檢測(cè)結(jié)果,可以了解整個(gè)豬群豬瘟抗體的狀況來(lái)決定是否及時(shí)開(kāi)展免疫及選擇適宜的免疫劑量,這樣可以大大的避免豬瘟病的發(fā)生。
四、在懷疑發(fā)生豬瘟病時(shí)使用
可以采集病豬血液(血清)用豬瘟抗體快速檢測(cè)卡檢測(cè),如果是發(fā)生豬瘟病時(shí),豬體血液中沒(méi)有豬瘟抗體或抗體滴度很低。當(dāng)然,發(fā)生豬瘟而耐過(guò)不死的豬只,抗體滴度可能會(huì)很高。
五、在發(fā)生豬瘟后使用
進(jìn)行疫病監(jiān)測(cè)時(shí),可應(yīng)用抗體快速檢測(cè)卡進(jìn)行快速檢測(cè)。如豬場(chǎng)發(fā)生豬瘟病時(shí),常規(guī)的處理程序是全面隔離消毒和緊急預(yù)防注射。此時(shí)豬群特別是種豬場(chǎng)的豬群的抗體滴度差異很大,當(dāng)緊急預(yù)防注射后的抗體滴度水平又會(huì)出現(xiàn)明顯的差異,因此,還應(yīng)了解豬群豬瘟抗體水平,制定合理的免疫程序尤為重要。